محیط کشت RPMI1640 جیبکو حجم 10 لیتر

محیط کشت RPMI1640

محیط کشت Rose well parkMemorial Institue(RPMI1640)که با نام محیط RPMI نیز شناخته می شود، یک محیط رشد است که در کشت سلول استفاده می شود. RPMI 1640 توسط مور و همکارانش در سال 1966 در موسسه یادبود روزول پارک ساخته شد و نام خود را نیز از آنجا گرفته است. با اصلاح محیط McCoy′ 5A (یاRPMI 1630)، این محیط به عنوان یک محیط مناسب برای سلول های لنفوبلاستوئید در کشت معلق فرموله شده است، اما همچنین می تواند از کشت طیف گسترده‌ای از سلول‌های متصل نیز پشتیبانی کند.

معرفی محصول:

• محیط Rose Park Memorial Institue
• 10لیتر
• برند گیبکو ( gibco )
• made in uk

فرمولاسیون:

مواد مورد نیاز برای ساخت یک لیتر از محیط RPMI 1640:

• گلوکز ( 2گرم )
• نشانگرPH فنول رد (5 میلی گرم )
• نمک ( کلرید سدیم 6گرم ، بی کربنات سدیم 2 گرم،دی سدیم فسفات1.512گرم ،سولفات منیزیم 400میلی گرم و نیترات کلسیم 100میلی گرم )
• اسیدآمینه ( 300 میلی گرم گلوتامین،200میلی گرم آرژنین ،50میلی گرم از هر کدام از اسیدآمینه های آسپاراژین،سیستین،لوسین و ایزولوسین ،40میلی گرم هیدروکلراید لیزین ،30میلی گرم سرین ،20 میلی گرم از هر کدام از اسیدآمینه اسید آسپارتیک ،اسیدگلوتامیک،هیدروکسی پرولین،پرولین ،ترئونین،تیروزین ،و والین ،15میلی گرم از هرکدام از اسیدآمینه های هیستیدین ،متیونین و فنیل آلانین،10 میلی گرم گلیسین ،5 میلی گرم تریپتوفان ،و 1میلی گرم گلوتاتیون کاهش یافته)
• ویتامین ها(1میلی گرم از هر کدام از ویتامین های پارا آمینوبنزوئیک اسید ، اسیدفولیک ،نیکوتین آمید،پیرودوکسین هیدروکلراید وتیامین هیدروکلراید،3میلی گرم کولین کلراید ،0.25میلی گرم پانتوتنات کلسیم ،0.2 میلی گرم هر بیوتین و ریبوفلاوین،و 0.005 میلی گرم سیانوکوبالامین و 35 میلی گرم i-inositol)

کاربرد :

1.محیط کشت RPMI نوعی محیط است که در کشت سلولی و کشت بافت استفاده می شود.این محیط حاوی فسفات است وبرای استفاده در جو دی اکسیدکربن 5%فرموله شده است .

RPMI 1640 .2 برای رشد دادن سلول های لنفاوی انسانی بدون نیاز به سرم استفاده می شود. این محیط از سیستم بافری بی کربنات استفاده می کند و از نظر فرمولاسیون، به طور معمول pH= 8 دارد که چیزی متفاوت از بیشتر محیط های کشت مخصوص سلول های پستانداران است.

3.RPMI 1640 را می توان با مقدار کافی ای از سرم مغذی کرد که این امر اجازه می دهد تا انواع مختلف سلول ها، به ویژه لنفوسیت های T / B انسانی، سلول های مغز استخوان و سلول های هیبریدوما در این محیط رشد پیدا کنند.

4.استفاده از محيط كشت RPMI 1640 جهت كشت Giardia lamblia
تك ياخته Giardia lamblia در ابتداي روده باريك انسان زندگي نموده و باعث بيماري و سوء جذب، به خصوص در اطفال مي گردد. اين انگل از نظر شيوع يكي از فراوان ترين عوامل انگلي بيماريزا در انسان بوده و از نظر پزشكي حايز اهميت فراوان مي باشد. لذا تحقيق و مطالعه در مورد اين انگل مورد توجه است .
مطالعات بيولوژيك تك ياخته مستلزم دست يابي به تروفوزوييت در شرايط آزمايشگاهي است. همچنين با گسترش تستهاي سرولوژيك و نياز به آنتي ژن انگل، تكثير تروفوزوييت در آزمايشگاه بیش از پیش احساس می شود .
در اين تحقيق ازمحيط كشت RPMI 1640جهت رشد و تكثير ژيارديا استفاده می گردد.

مراحل :

1.درابتدا كيستها به روش سوكروز چهار لايه اي تخليص و پس از تحريك در محيط اسيدي به لوله هايي حاوي محيط كشت منتقل و در انكوباتور 37 درجه سانتي گراد نگهداري می شوند.

2.نمونه ها پس از 24 ساعت، به مدت يك هفته، هر روز از نظر وجود تروفوزوييت بررسي میگردند.

3.نتایج پس از یک هفته :از 53 نمونه كشت داده شده، در 25 نمونه تروفوزوييت ژيارديا رويت گرديد. (تكثير تك ياخته به مدت طولاني و مقدار فراوان صورت نگرفت و مدت زمان متوسط حيات تروفوزوييت 38.6 ساعت محاسبه گرديد.)
4.نتايج اين تحقيق نشان مي دهد كه از محيط كشت RPMI 1640 مي توان جهت تبديل كيست ژيارديا به تروفوزوييت و همچنين نگهداري تروفوزوييت در شرايط آزمايشگاهي استفاده نمود.( اما براي تكثير و پاساژ آن لازم است مواد ديگري به محيط اضافه شود.)

The information of culture medium

gibco

51800-035:REF

2083098:LOT

Rose Well Park Memorial Institue

10L