دستگاه ترموسایکلر PCR اپندروف

ترموسایکلر (Thermal Cycler) از برند Eppendorf

دستگاه ترموسایکلر PCR در آزمایشگاه‌های زیست‌مولکولی برای انجام واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) استفاده می‌شود. این دستگاه دما را به‌صورت دقیق و قابل‌برنامه‌ریزی تغییر می‌دهد تا فرآیند تکثیر DNA انجام شود.

عملکرد آن بر اساس تغییرات دقیق دما در سه مرحله اصلی است:

1. دناتوراسیون (Denaturation):

• در این مرحله، دما تا حدود ۹۵ درجه سانتی‌گراد افزایش می‌یابد تا رشته‌های دوگانه DNA از هم جدا شوند.

2. اتصال پرایمر (Annealing):

• دمای دستگاه کاهش می‌یابد (معمولاً بین ۵۰ تا ۶۵ درجه سانتی‌گراد) تا پرایمرها به توالی‌های مکمل روی DNA متصل شوند.

3. گسترش (Extension):

• دمای دستگاه به حدود ۷۲ درجه سانتی‌گراد می‌رسد تا آنزیم Taq پلی‌مراز، نوکلئوتیدها را به پرایمرها اضافه کرده و رشته جدید DNA را بسازد.
• این چرخه‌ها چندین بار (معمولاً ۲۵ تا ۴۰ بار) تکرار می‌شوند و در هر بار، مقدار DNA دو برابر می‌شود.

ویژگی‌های دستگاه ترموسایکلر اپندروف:

صفحه نمایش دیجیتال: برای نمایش و تنظیم دما و زمان. دکمه‌های کنترلی: جهت تنظیم برنامه‌ها و پارامترهای مختلف. محفظه نمونه: در بالای دستگاه قرار دارد که تیوب‌های حاوی نمونه در آن قرار می‌گیرند. دقت دمایی بالا: برای تضمین صحت تکثیر DNA.

برخی از ویژگی‌های کلیدی دستگاه ترموسایکلر:

1. دقت دمایی بالا:

• قابلیت تنظیم دما با دقت ۰.۱ درجه سانتی‌گراد.
• پایداری و یکنواختی دمایی در سراسر محفظه نمونه برای اطمینان از تکثیر دقیق DNA.

2. برنامه‌ریزی پیشرفته:

• امکان تعریف و ذخیره چندین برنامه PCR با مراحل و سیکل‌های مختلف.
• رابط کاربری ساده با دکمه‌های کنترلی و نمایشگر دیجیتال برای تنظیم آسان برنامه‌ها.

3. محفظه نمونه:

• طراحی سازگار با تیوب‌های مختلف (مانند ۰.۲ و ۰.۵ میلی‌لیتر) و پلیت‌های ۹۶ خانه.
• سیستم گرمایش/سرمایش با کارایی بالا برای تغییر سریع دما بین مراحل مختلف PCR.

4. سیستم خنک‌کننده (Cooling System):

• مجهز به سیستم Peltier برای تغییر سریع و دقیق دما.
• امکان نگه‌داشتن نمونه‌ها در دمای پایین پس از اتمام PCR برای جلوگیری از تجزیه DNA.

5. رابط کاربری آسان و پیشرفته:

• نمایشگر LCD برای مشاهده تنظیمات و وضعیت دستگاه.
• دکمه‌های میان‌بر برای اجرای سریع برنامه‌های پرکاربرد.
• قابلیت اتصال به کامپیوتر برای انتقال داده‌ها و به‌روزرسانی نرم‌افزار.

6. ایمنی و پایداری:

• سیستم محافظت در برابر افزایش دمای ناگهانی.
• طراحی مقاوم و پایدار برای کارکرد طولانی‌مدت در محیط‌های آزمایشگاهی.

7. قابلیت‌های ویژه (در برخی مدل‌ها):

• Gradient Function: امکان تنظیم گرادیان دما برای بهینه‌سازی دمای اتصال پرایمرها.
• Multiple Block Formats: امکان تعویض بلوک حرارتی برای تطابق با انواع تیوب و پلیت.
• اتصال USB یا LAN: برای انتقال داده‌ها و آپدیت‌های نرم‌افزاری.

دستگاه ترموسایکلر در فارسی با نام‌های مختلفی شناخته می‌شه:

ترموسایکلر (Thermal Cycler): این اسم از معادل انگلیسی گرفته شده و در بین متخصصان رایج هست. PCR ماشين (PCR Machine): چون این دستگاه به‌طور اختصاصی برای انجام PCR استفاده می‌شه، خیلی‌ها بهش همین اسم رو می‌گن. دستگاه تکثیر DNA: به‌خاطر کاربردش در تکثیر DNA به این اسم هم شناخته می‌شه. ماشین چرخه دمایی: چون دما رو به‌صورت چرخه‌ای تغییر می‌ده. دستگاه واکنش زنجیره‌ای پلیمراز: ترجمه دقیق‌تر اسم علمی‌اش هست، ولی کمتر استفاده می‌شه.

مهم‌ترین کاربرد های دستگاه تکثیر DNA:

1. تشخیص بیماری‌ها و عوامل عفونی:

• تشخیص ویروس‌ها و باکتری‌ها: مثل تشخیص ویروس‌های کرونا (COVID-19)، اچ‌آی‌وی (HIV)، هپاتیت و آنفلوانزا.
• بیماری‌های ژنتیکی: شناسایی جهش‌های ژنی و اختلالات ژنتیکی مانند فیبروز کیستیک یا سندرم داون.
• تشخیص سرطان: بررسی نشانگرهای ژنتیکی سرطان و جهش‌های مرتبط.

2. تحقیقات ژنتیکی و مولکولی:

• توالی‌یابی DNA و RNA: برای شناسایی توالی نوکلئوتیدها و مقایسه ژنوم‌ها.
• بررسی بیان ژن (Real-Time PCR): برای مطالعه سطح بیان ژن‌ها در شرایط مختلف.
• کلونینگ ژنی: تکثیر ژن‌های خاص برای درج در پلاسمیدها و استفاده در مهندسی ژنتیک.
• مطالعه جهش‌ها و پلی‌مورفیسم‌ها: برای بررسی تنوع ژنتیکی در جمعیت‌ها.

3. پزشکی قانونی (Forensic Science):

• تعیین هویت: با استفاده از پروفایل DNA در موارد جنایی و شناسایی افراد.
• تعیین نسبت خویشاوندی: مثل آزمایش تعیین والدین (تست پدری).

4. بیوتکنولوژی و مهندسی ژنتیک:

• تولید موجودات تراریخته: برای وارد کردن ژن‌های جدید به گیاهان، حیوانات یا میکروارگانیسم‌ها.
• تولید پروتئین‌های نوترکیب: مثل هورمون‌ها، آنزیم‌ها و آنتی‌بادی‌ها.

5. علوم کشاورزی و محیط زیست:

• تشخیص بیماری‌های گیاهی: شناسایی ویروس‌ها و باکتری‌های بیماری‌زا در گیاهان.
• شناسایی موجودات تراریخته (GMO Detection): بررسی محصولات غذایی از نظر وجود DNA تراریخته.
• پایش زیست‌محیطی: شناسایی میکروارگانیسم‌های موجود در آب، خاک یا هوا.

6. تحقیقات باستان‌شناسی و تکاملی:

• تحلیل DNA باستانی (Ancient DNA): برای مطالعه بقایای موجودات منقرض‌شده یا انسان‌های اولیه.
• بررسی تکامل گونه‌ها و فیلوژنی: مقایسه توالی‌های ژنی برای بررسی روابط تکاملی.

7. تست‌های حساسیت دارویی و پزشکی شخصی‌سازی‌شده:

• فارماکوژنتیک: بررسی ژن‌های مرتبط با پاسخ به داروها برای شخصی‌سازی درمان.
• تشخیص مقاومت دارویی: شناسایی جهش‌های ژنتیکی که منجر به مقاومت به آنتی‌بیوتیک‌ها یا داروهای ضد ویروسی می‌شه.

برای استفاده از دستگاه ترموسایکلر مراحل زیر را انجام دهید:

۱. آماده‌سازی نمونه‌ها و مواد لازم: DNA الگو (Template DNA): ماده ژنتیکی که می‌خواهید تکثیر کنید. پرایمرها (Primers): قطعات کوتاه DNA که به توالی هدف متصل می‌شوند. نوکلئوتیدها (dNTPs): واحدهای سازنده رشته جدید DNA. آنزیم Taq پلی‌مراز: آنزیمی که DNA رو تکثیر می‌کند. بافر PCR: برای حفظ pH مناسب و افزایش کارایی آنزیم. آب دیونیزه: برای تنظیم حجم نهایی. ۲. آماده‌سازی محلول PCR:

• همه مواد رو با نسبت‌های مناسب در تیوب‌های PCR ترکیب کنید:
• DNA الگو: ۱-۱۰ نانوگرم
• پرایمر جلو و عقب: هرکدام ۰.۱ تا ۱ میکرومولار
• dNTPs: ۲۰۰ میکرومولار از هر نوکلئوتید
• Taq پلی‌مراز: ۱ واحد (U)
• بافر PCR :۱X
• حجم نهایی رو با آب دیونیزه به ۲۰ یا ۵۰ میکرولیتر برسانید.

۳. آماده‌سازی دستگاه:

• دستگاه رو روشن کنید و مطمئن شوید که به‌درستی کالیبره شده.
• تیوب‌های PCR رو در محفظه نمونه (Block) قرار بده.
• مطمئن شوید که درپوش محکم بسته شده تا تبخیر نمونه‌ها به حداقل برسد.

4. نکات ایمنی و نگهداری:

• همیشه از دستکش و روپوش استفاده کنید تا از آلودگی جلوگیری شود.
• تیوب‌ها رو محکم ببندید تا نشتی نداشته باشند.
• بعد از اتمام کار، دستگاه رو خاموش و محفظه رو تمیز کنید.

این اطلاعات بهت کمک می‌کنه تا بدونی این دستگاه تحت چه شرایطی باید استفاده بشه و از چه منبع برقی تغذیه می‌کنه: _نام و شرکت سازنده:

• Eppendorf AG – نام شرکت تولیدکننده که در زمینه تجهیزات آزمایشگاهی تخصص دارد.
• 22331 Hamburg – آدرس یا کد پستی دفتر مرکزی در هامبورگ، آلمان.

_مشخصات الکتریکی:

• 230 V – ولتاژ مورد نیاز (۲۳۰ ولت) که مطابق با استاندارد اروپا هست.
• 50-60 Hz – فرکانس برق ورودی (۵۰ تا ۶۰ هرتز).
• 0.8 A – میزان جریان مصرفی (۰.۸ آمپر).
• 150 W – توان مصرفی (۱۵۰ وات).

_اطلاعات فیوز:

• 2x T 2 A / 250 V – این دستگاه از دو فیوز نوع T با ظرفیت ۲ آمپر و ولتاژ ۲۵۰ ولت استفاده می‌کنه. این فیوزها برای محافظت از دستگاه در برابر نوسانات برق هستن.

_گواهینامه‌ها و تولید:

• CE Mark: این علامت نشون می‌ده که دستگاه با استانداردهای ایمنی و کیفیت اروپا مطابقت داره.
• Made in Germany: تولید شده در آلمان.
• Inspected by: دستگاه توسط Eppendorf بازرسی کیفی شده.

  برای اطلاع از قیمت یا خرید دستگاه ترموسایکلر PCR از طریق اطلاعات صفحه تماس با ما در ارتباط باشید .